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AF46型美國OPTEK紫外線分析儀在生物學研究應用表現在哪些方麵
點擊次數:1342 更新時間:2021-02-25

AF46是一款雙波長,高精度紫外線吸收分析儀,專為在線操作而設計,可提供濃度測量結果,並具有出色的可重複性,線性和分辨率。波長和光程長度可以單獨配置以滿足特定要求,以實現精度。
AF46是一款雙波長紫外線分析儀,非常適合在下遊生物技術應用(例如色譜或過濾)中監測蛋白質濃度(例如,單克隆抗體)。使用兩個不同的波長,傳感器能夠檢測到非常低的蛋白質濃度以進行準確的合並,同時能夠使用第二個波長以非常高的光密度(OD)監控整個洗脫峰。
除了蛋白質測量外,傳感器通常還用於監測蛋白質溶液的核酸汙染。由於模塊化,可以組合使用不同的光程長度(OPL)和波長來測量在UV範圍內吸收的任何產品。

紫外分析儀分為很多係列,有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等係列,不同的紫外分析儀有不同的用途。AF46型美國OPTEK紫外線分析儀采用不同波長引進電泳分析、檢測,PCR產物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。圖片僅介紹了三用紫外分析儀的外形。

AF46型美國OPTEK紫外線分析儀在生物學研究應用
物質經過紫外線照射後發出熒光的現象可分為兩種情況,一種是自發熒光,如葉綠素、血紅素等經紫外線照射後,能發出紅色的熒光,稱為自發熒光;二種是誘發熒光,即物體經熒光染料染色後再通過紫外線照射發出熒光,稱為誘發熒光。
熒光技術在生物化學及分子生物學研究中應用主要包括以下幾個方麵:
1、AF46型美國OPTEK紫外線分析儀物質的定性:不同的熒光物質有不同的激發光譜和發射光譜,因此可用熒光進行物質的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。
2、AF46型美國OPTEK紫外線分析儀定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關係可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用於測定氨基酸、蛋白質、核酸的含量。熒光定量測定的一個優點是靈敏度高,例如維生素B2的測定*可達1毫微克/毫升,這一優點使測定時所需要樣品量大大減少。 這種定量測定方法還可應用於酶催化的反應,隻要反應前後有熒光強度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應的速率等。
3、AF46型美國OPTEK紫外線分析儀研究生物大分子的物理化學特性及其分子的結構和構象:熒光的激發光譜、發射光譜、量子產率和熒光壽命等參數不僅和分子內熒光發色基團的本身結構有關,而且還強烈地依賴於發色團周圍的環境,即對周圍環境十分敏感。利用此特點可通過測定上述有關熒光參數的變化來研究熒光發色團所在部位的微環境的特征及其變化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的熒光發色團(如色氨酸、酪氨酸、鳥苷酸等,此類熒光稱為內源熒光)以外,可將一些特殊的熒光染料分子共價地結合或吸附在生物大分子的某一部位,通過測定該染料分子的熒光特性變化來研究生物大分子,這種染料分子被稱為“熒光探針”,它們發出的熒光一般稱為外源熒光。熒光探針的應用,大大地開拓了熒光技術在分子生物學中的應用範圍。
4、AF46型美國OPTEK紫外線分析儀利用熒光壽命、量子產率等參數可以研究生物大分子中的能量轉移現象:通過該現象的研究,可以獲得生物大分子內部的許多信息。

以往人們常用熒光偏振做指標來研究生物大分子動力學。人們趨於用熒光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中,激發光不是一連續的麵偏振光,而是一偏振的光脈衝,因此測得的F∥和F是在兩個不同方向上偏振的熒光隨時間的衰減,它既和熒光壽命τ有關,又與分子在溶液中的運動有關,因此常表示為F∥(t)和F⊥(t)。由它們可得一相當重要的物理量——各向異性參數A(t)。由A(t)可推測生物大分子的形狀、分子轉動弛豫時間(即從一個定向的狀態到一個無定向狀態所要的時間),進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動角度和時間之間的函數關係。由這些結果可以研究分子之間的相互作用、分子間結合的緊密程度、蛋白質、核酸分子的解聚程度等等。
另外,AF46型美國OPTEK紫外線分析儀在免疫學中亦有廣泛的應用。重要的就是熒光抗體法。將某些熒光染料與血清抗體相結合,這種標記的抗體仍可專一地與相應抗原發生結合,形成的複合體具有熒光特性,從而可以確定抗原或抗體的存在及其含量。

利用熒光技術設計的AF46型美國OPTEK紫外線分析儀主要是物質的定性方麵的應用,包括:
⑴在科學實驗工作中檢測,許多主要物質如蛋白質、核苷酸等。
⑵在藥物生產和研究中,可用來檢查激素生物堿,維生素等各種能;產生熒光藥品質量,特別適宜作薄層分析和紙層分析斑點和檢測。
⑶在染料塗料橡膠、石油等化學行業中,測定各種熒光材料,熒光指示劑及添加劑,鑒別不同種類的原油和橡膠製品。
⑷紡織化學纖維中可測定不同種類的原材料。如羊毛,真絲人造纖維,棉花,合成纖維,並可檢查成品質量。
⑸在糧油,蔬菜,食品部門,可用於檢查毒素(如黃曲/黴素等),食品添加劑,變質的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的質量。
⑹在地質、考古等部門,可起到發現各種礦物質,判別文物化石的真偽。
⑺在部門可檢查指紋、測定密寫字跡等。

AF46型美國OPTEK紫外線分析儀用於
紫外線範圍:
0-0.05至2 CU(濃度單位),取決於所使用的濾波器/ OPL
紫外線吸收控製和紫外線吸收控製
色譜中的應用:柱前/柱後監控(OD),用於優化合並
滲透物或截留物中的濃度
在TFF中/超濾
水/冷凝水中有機負荷的變化
芳烴(己內酰胺,苯胺,苯酚等)的濃度
作為TOC,COD,BOD趨勢分析
水的消毒控製處理

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